尹派的起腔有鲜明特色。它起音较低，音调亲切自然，在不同剧目中根据不同人物的具体感情，变化多端，尹派起腔常出现在唱段中间，尤其是大段叙述性的唱段之中，随着人物感情的转折，突然插入一个节奏舒缓、韵味醇厚的起腔，不但使人物感情得到充分抒发，而且使观众获得一种欣赏的满足感。如《山河恋·送信》中的"妹妹啊"，音调亲切婉转，充满深情柔意，真切表达了对心上人的爱慕之情;《何文秀·算命》中的"妈妈听道"则音调朴实，语气恳切，是整段"清板"的启示性唱句;《桃花扇·追念》中的"香君啊"，在层层下行的旋律进行中，连续加以装饰倚音的润腔，使音调具有一种哭腔因素。其他如《秋海棠·心心相印》中的"真不会感到寂寞啊"，《红楼梦·金玉良缘》中的"妹妹啊"《盘妻索妻·洞房》中的"娘子啊"等等起腔，也都各有特点。

尹桂芳在塑造不同人物的音乐形象时，广泛吸收兄弟剧种的营养，丰富自己。在《何文秀》的"哭牌算命"一场中，唱腔以"四工腔"为基础，吸收借鉴了杭剧"武林调"和苏州弹词的因素，创造了新颖的"算命调"。这种曲调说唱结合，节奏灵活，幽默诙谐，声声入耳。

为了塑造爱国诗人屈原的形象，尹桂芳一改过去惯演的儒雅、温顺的小生的风格，唱腔和唱法，吸收了京剧老生腔的某些特点以及绍剧中激昂高亢的音调，使尹派唱腔增加了苍劲雄浑、刚健挺拔的因素。"天问"这段唱，吸收了绍剧"流水板"激越的音调，中间还穿插着节奏紧密、铿锵有力的"扑灯蛾"念诵，唱念浑然一体，气势磅礴。